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2020/12/21 12:03:21

上海凈信Tissuelyser高通量組織研磨儀在低溫破碎酵母細胞中的使用說明

Source：Shanghai Jingxin

條形酵母是將酵母通過小孔注入到裝有液體氮的氣罐中壓縮制成的。將有篩子的扣入到裝有球狀酵母的破碎罐的頂部，經過離心破碎變成了條狀物。壓力是由人工用自由活塞注射器注入罐內，條狀可以在-80C°下被保存。

使用上海凈信Tissuelyser全自動樣品快速研磨儀對酵母進行研磨，將不銹鋼鋼珠和樣本分別裝入研磨鋼罐中，然后放入到用聚苯乙烯盒子盛放的液氮中，當預冷凍過程結束后，時間一分鐘左右，或者直到原來沸騰的液體氮恢復平靜，將破碎罐從液氮中取出，并要將破碎罐沾有的液體全部清理干凈，以避免在破碎過程中發生爆炸。研磨鋼罐最好用坩堝鉗或大鑷子夾取出來，而且通常要帶經過冷凍的手套，凍傷以免。

研磨鋼罐中酵母量不要太多，否則可能會研磨不充分，留有殘渣，一般為研磨鋼罐的1/3左右為宜，把剛從液氮中取出的鋼罐安裝在凈信Tissuelyser全自動樣本快速研磨儀中，分幾次去進行研磨，去設置頻率和時間參數，每次間隔都把研磨罐放入液氮中冷卻。

在每次破碎后都要將破碎罐取下，放入到液氮中進行冷凍，當液氮不在沸騰時，可以將鋼罐取出，破碎可以繼續進行。

經過100秒的破碎后，我們通過顯微鏡觀察可以發現95%的酵母已經達到破碎效果，用于下一步的實驗過程。剩余的酵母可以儲存，備用。

研磨鋼罐和鋼珠都可重復利用，破碎罐和破碎球可以用溫的乙醇清洗，放到干燥處貯存。

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